Varijacije u kliničkoj slici i epidemiologiji dubokih dermatomikoza vlasišta [The clinical pattern variations and epidemiology of deep seated tinea capitis]

Gorgievska-Sukarovska, Biljana (2017) Varijacije u kliničkoj slici i epidemiologiji dubokih dermatomikoza vlasišta [The clinical pattern variations and epidemiology of deep seated tinea capitis]. PhD thesis, Sveučilište u Zagrebu.

PDF Download (3MB)

Abstract

Tinea capitis caused by Microsporum canis is usually noninflammatory. However, progressive number of severe kerion like tinea capitis (TC) due to M. canis has been recently registered. Providing that the same fungal species might evoke different clinical patterns, interspecies polymorphism within M. canis isolates might have been responsible for this phenomenon. The aim of this study was to examine genotypic variability among isolates of M. canis from patients with superficial and deep seated tinea capitis. Sixty strains of M. canis from patients with both superficial and deep seated tinea capitis have been isolated and identified to the species level using standard and advanced mycological procedure techniques. Morphological identification was confirmed by molecular methods PCR-RFLP (Polymerase Chain Reaction-Restriction Fragment Length Polymorphism). After amplification of ITS1-5.8S-ITS2 region, the PCR product was exposed to restriction enzyme HinfI. All strains of M. canis had identical pattern on gel electrophoresis. For sub typing of M. canis isolates the RAPD (Random Amplified Polimorphic DNA) has been perfomed using (ACA)5 and (GACA)4 primers. After RAPD amplification with (ACA)4 primer, among all M. canis isolates only one RAPD profile was determined, whereas using (GACA)4 primer two different band patterns were confirmed. According to the results of the epidemiological part of our study M. canis remained the main causative agent of TC in Croatia. The incidence of TC remained high during the ten-years period (2006-2015), but decrease in the incidence of TC was observed in the first 5 years, with stable incidence of TC during the last 5 years of the study period. A statistically significant increase of TC among all fungal skin infections during the last 3 years was observed. The association between RAPD profiles and certain clinical type of tinea capitis was not determined by the use of GACA4 primer . Results of most molecular studies show that there is no clonal differentiation within M. canis. Moreover, using the same (GACA)4 primer M. canis was found not to be genotypically unique. However, furhter investigations on larger group of patiens might be required in order to elucidate this problem more precisely.

Abstract in Croatian

Standardni obrazac kliničke slike dermatomikoze vlasišta uzrokovane gljivom vrste Microsporum canis jest površinska dermatomikoza karakterizirana cirkumskriptnim eritemom, adherentnom deskvamacijom i poremećajem integriteta vlasi. Zadnjih dvadesetak godina primjećuje se, međutim, da ista vrsta gljive može biti i uzročnikom vrlo impresivne kliničke slike duboke mikoze vlasišta (kerion Celsi) karakterizirane granulomatoznom upalom, tumoroznom masom i obilnom pustuloznom sekrecijom, što, uzevši u obzir tipičnu pojavnost u dječjoj dobi, može ozbiljno uticati na kvalitetu zdravlja djeteta i opravdanu zabrinutost roditelja. Razlog pojavi da ista vrsta gljive može uzrokovati dva klinički vrlo različita obrasca kliničke slike mikoze vlasišta nije još objašnjen. Osnovna pretpostavka ovog istraživanja bila je da različiti genotipovi gljive vrste M. canis uzrokuju površinsku odnosno duboku mikozu vlasišta kao dva zasebna klinička entiteta i da genotipske razlike unutar gljive vrste M. canis su odgovorne za pojavu različite virulentnosti gljive, te time i za pojavu različitih kliničkih manifestacija mikrosporoze vlasišta. Primarni cilj istraživanja bio je ispitati genotipsku varijabilnost izolata gljive vrste M. canis u ispitanika s površinskom i dubokom mikozom vlasišta. U ispitivanje je bilo uključeno 60 ispitanika - djeca u dobi od 2 do 12 godina (30 ispitanika s površinskom i 30 ispitanika s dubokom mikozom vlasišta). Primjenom metodologije mikološke obrade u svih ispitanika je identificirana vrsta M. canis. Morfološka identifikacija je potvrđena molekularnom metodom PCR-RFLP (Polymerase Chain Reaction-Restriction Fragment Length Polymorphism), amplifikacijom ITS1-5.8S-ITS2 regije i primjenom HinfI restrikcijskog enzima. Za subtipizaciju M. canis korištena je RAPD (Random Amplified Polimorphic DNA) metoda, primjenom (ACA)5 i (GACA)4 početnica. Korištenjm (ACA)5 početnice dobiven je jedinstveni RAPD profil. Primjenom (GACA)4 početnice identificirana su dva RAPD profila. U epidemiološkom dijelu našeg istraživanja zaključili smo da je (i dalje) M. canis vodeći uzročnik dermatomikoza vlasišta u Republici Hrvatskoj. Učestalost zoofilne mikrosporoze vlasišta još je uvijek visoka, no, tijekom desetogodišnjeg razdoblja (2006.-2015.) vidljiv je trend opadanja broja kulturom potvrđenih dermatomikoza vlasišta u prvih pet godina istraživanja, uz stabilizaciju broja pozitivnih kultura zadnjih 5 godina. Vidljiv je i statistički značajno veći udio dermatomikoze vlasišta unutar svih kliničkih manifestacija dermatofitoza u zadnje 3 godine istraživanja (2013.-2015.). Na temelju rezultata molekularno-medicinskog dijela istraživanja nije utvrđena statistički značajna razlika raspodjele prema PCR profilu za tip kliničke slike (površinska versus duboka dermatomikoza vlasišta). No, istraživanje je pokazalo da M. canis nije genotipski jednoobrazan. Primjenom RAPD metode i korištenjem (GACA)4 početnice identificirali smo dva profila među ispitanim sojevima M. canis, što pokazuje da M. canis ipak nije „genotipski stabilan“ kako pokazuju dosadašnje studije. Na temelju rezultata našeg istraživanja može se, između ostalog zaključiti da tip kliničke slike mikrosporoze vlasišta (površinska versus duboka mikoza vlasišta) nije rezultat infekcije točno određenim genotipom gljive vrste M. canis. Oba tipa kliničke slike mikrosporoze vlasišta mogu biti uzrokovana istim genotipom M. canis.

Actions (login required)

View Item

Downloads