Izolacija i karakterizacija mezenhimskih matičnih stanica iz nepčanih tonzila

Janjanin, Saša (2009) Izolacija i karakterizacija mezenhimskih matičnih stanica iz nepčanih tonzila. PhD thesis, Sveučilište u Zagrebu.

Preview

PDF Download (1MB) | Preview

Abstract

Mesenchymal stem cells (MSCs) are adult multipotent progenitor cells that have the ability to differentiate into lineages of mesenchymal tissues including cartilage, bone and fat. They were originally isolated from bone marrow (BM-MSCs), but current challenges of clinical application of BM-MSCs include donor-site morbidity, and low cell yields associated with age-related decrease in cell number and differentiation potential, underscoring the need to identify alternative sources of MSCs. In the present work, the presence of MSCs in tonsillar tissue is reported for the first time. We performed comparative and quantitative analyses of BM-MSCs with a subpopulation of adherent cells isolated from this lymphoid tissue, termed tonsil-derived MSCs (T-MSCs). Surface epitope analysis revealed that T-MSCs were negative for CD14, CD31, CD34 and CD45 expression and positive for CD29, CD44, CD90 and CD105 expression, a characteristic phenotype of BM-MSCs. Similar to BM-MSCs, T-MSCs could be induced to undergo adipogenic, osteogenic and chondrogenic differentiation. Differentiation potential of T-MSCs was analyzed histologically, histochemically and by RT-PCR for the expression of lineage related marker genes. T-MSCs did not express class II MHC antigens, suggesting a potential role as a human allogeneic cell source for cell-based therapies. Thus, human palatine tonsil-derived MSCs, which are easily accessible without ethical concerns, represent an attractive alternative source for adult progenitor cells or MSCs for basic research and future clinical applications.

Abstract in Croatian

Mezenhimske matične stanice (MMS) su multipotentne progenitorske stanice podrijetlom od odraslih tkiva, koje imaju sposobnost diferencijacije u različita tkiva mezodermalnog podrijetla, uključujući kost, hrskavicu i masno tkivo. Danas se za istraživačke i terapijske svrhe MMS najčešće izoliraju iz koštane srži (KS-MMS), no problemi vezani uz njihovu primjenu uključuju morbiditet donorskog mjesta, malen broj izoliranih stanica za terapijske svrhe i slabljenje diferencijacijskog potencijala s povećanjem dobi davatelja. Sve navedeno razlog je potrazi za alternativnim i mlađim donorskim izvorima MMS. U ovoj se disertaciji prvi put predstavlja i opisuje izolacija MMS iz nepčanih tonzila. Izvršena je komparativna i kvantitativna analiza adherentnih stanica iz tog tkiva, nazvana tonzilarnim MMS (T-MMS). T-MMS su uspoređene s KS-MMS, dobro istraženim i karakteriziranim tipom MMS. Analiza površinskih biljega pokazala je da T-MMS nemaju CD14, CD31, CD34 i CD45, a da izražavaju CD29, CD44, CD90 i CD105 biljege, što je karakterističan fenotip KS-MMS. Poput KS-MMS, i T-MMS je bilo moguće diferencirati u adipocite, osteocite i hondrocite. Diferencijacijski potencijal T-MMS je analiziran histološkim i histokemijskim pretragama, te RT-PCR analizom ekspresije gena znakovitih za pojedina mezenhimska tkiva. Populacija stanica izoliranih iz tonzila na površini ne izražava MHC molekule II. razreda, što može omogućiti terapijsku primjenu alogenih T-MMS. S obzirom na jednostavan kirurški pristup i izostanak etičkih dvojba oko tonzilektomije, ljudske nepčane tonzile mogle bi se iskoristiti kao prikladan alternativni izvor mladih i brzo proliferirajućih progenitorskih stanica za bazična istraživanja i terapijske primjene.

Actions (login required)

View Item

Downloads